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端粒酶

端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的特殊反转录酶,与真核生物细胞DNA末端的端粒(一段特定的核苷酸序列及结构)的合成有关。正常体细胞的端粒长度是随着细胞的分裂逐渐缩短的,端粒酶活性增强,可维持端粒的长度不缩短,使细胞永久增殖而癌变。故端粒酶检测及其抑制剂可用于肿瘤诊断和治疗。

基本信息

专科分类:肿瘤科检查分类:免疫检查

适用性别:男女均适用是否空腹:非空腹

参考价格:30-40元

分析结果:

低于正常值时:

正常值:

高于正常值时:

阴性:
正常为阴性。

阳性:
小细胞肺癌早期即有端粒酶活性升高,非小细胞肺癌多于中晚期出现活性改变。

温馨提示:
保持平常心态。
正常值

阴性。

临床意义

适应于各类肿瘤性疾病的诊断和鉴别诊断。

升高:肝癌(93.88OD/30μg蛋白质)、癌周围组织(24.09OD/30μg蛋白质)。

小细胞肺癌早期即有端粒酶活性升高,非小细胞肺癌多于中晚期出现活性改变。

结果阳性可能疾病:
注意事项

1.注意防止实验室污染而出现假阳性或假阴性。

2.注意去除组织标本中含有的多聚酶抑制剂,减少假阴性。

3.闪烁分析技术、ELISA法、原位杂交法较TRAP法检测结果更可靠。

检查过程

采集血液标本后立即送检,进行肿瘤免疫检测。

检测操作:

基因组DNA为0.1μg,缓冲液含50mmol/L氯化钾,10mmol/L Tris-HCl(pH8.4),1.5mmol/L氯化镁,100μg明胶,每一引物为0.25μmol/L;dATP,dCTP,dGTP,dTIP各为200μmol/L,DNA聚合酶为2.5U,终体积为100μl。加数滴液体石蜡防止蒸发。

反应周期:①变性:90℃ 30~60s,②引物和模板的退火温度:40~60℃ 30~60s,③延伸:72℃ 1~2min。经反复循环30~40次,最后1次72℃引物延伸7min后终止。除去液体石蜡后,产物可供分析。经琼脂糖凝胶电泳后,用溴乙锭染色,经紫外灯照射可见预料扩增长度的荧光条带。产物也可与放射标记或非放射标记的寡聚核苷酸探针行Southern印迹杂交或点渍印迹杂交。如用PCR自动仪则更为方便,将反应试剂、DNA模板及Taq-DNA聚合酶加入试管后,放进已调好程序,即所需变性→退火→延伸各自的温度和时间及循环次数的自动仪中进行反应,即可获得满意的扩增产物。

不适宜人群

无检查适应症者,不宜进行检测。

不良反应与风险

1、感染:采集血液时注意无菌操作,采血处避免水液等污染,以免局部感染。

2、出血:采血后给予充分按压时间,尤其有凝血障碍,出血倾向者,避免局部皮下渗血,淤青肿胀。

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