硝酸盐还原试验是根据某些细菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸,后者与α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸这个原理进行的试验方法。
体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡。
本试验广泛用于细菌鉴定。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐;假单胞菌属中有的细菌能产生氮气,如铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、斯氏假单胞菌,有的则能还原硝酸盐为亚硝酸盐,如鼻疽假单胞菌等;厌氧菌如韦荣菌也能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
异常结果
肠杆菌科细菌引起肠道外感染以泌尿道感染为多见,机会性致病可引起化脓性炎症,如胆囊炎、腹膜炎、肺炎、脑膜炎和败血症等。绿脓假单胞菌属感染坏疽深脓疱病、绿甲综合征、外耳道炎、毛囊炎。还有某些厌氧菌所致的一些疾病。
不合宜人群: 没有。
检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。
检查时要求:积极配合医生。
试验判断要求:硝酸盐还原过程可因细菌不同而异。有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐,如大肠埃希菌等,有的细菌可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵,有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮,如沙雷菌属,有的细菌还可以将其还原产物在合成性代谢中完全利用。试验要根据试验结果进行判断,还要排除干扰。
试剂
甲液:氨基苯磺酸 0.8g 5mol/L醋酸 100ml
乙液:α-萘胺 0.5g 5mol/L醋酸 100ml
硝酸盐还原试验方法
将被检查部分的取出的培养液中待检菌接种于硝酸盐培养基(内含小倒管)中,35℃孵育1~4d。将甲、乙等量混合液(用时混合)0.1ml加于试管内,立即或10min内观察结果。做此试验时,应以一支未接种细菌的培养基做对照试验,只有对照管阴性时,才能判定。
结果
出现红色为阳性反应。如欲观察有无氮气产生,可于培养基管内加1只小倒管,有气泡产生,则表示有氮气生成。如欲检查培养基中硝酸盐是否被分解,可取锌粉少许加入培养基内,如出现红色表明硝酸盐仍存在;若不出现红色,表示硝酸盐已被分解。
无。
无。