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钩端螺旋体病凝集溶解试验

钩端螺旋体病是由各种致病性螺旋体引起的人畜共患的自然疫源性疾病。致病性钩端螺旋体的群和血清型众多,其群特异性的化学组成为类脂多糖复合物,型特异性的化学组成为蛋白多糖复合物,不同型钩端螺旋体的多糖组成有所差异,患者体内可产生相应抗体,检查特异性抗体有助于本病的诊断。

基本信息

专科分类:传染病检查检查分类:病原微生物检查

适用性别:男女均适用是否空腹:空腹

参考价格:30元

温馨提示:
抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。
正常值

正常值为0~1∶40。

临床意义

异常结果:

1、升高钩端螺旋体病(早期)。

2、早期即表现为败血症,中期是败血症伴器官损伤期,后期是恢复期或后发症期。根据中期的表现又分为肺出血型、黄疸出血型(又称Weil病)、肾功能衰竭型和脑膜炎型等。

需要检查人群:

临床特征为体温升高、黄症、血红蛋白尿、出血性素质、流产、皮肤和黏膜坏死及水肿的患者。

注意事项

检查前:

1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。

2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。

3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。

检查后:

1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。

2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,更应延长按压时间。

3、抽血后出现晕针症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行体检。

4、若局部出现淤血,24小时后用温热毛巾湿敷,可促进吸收。

检查过程

1、钩端螺旋体病凝集溶解试验的原理

钩端螺旋体与相应的特异性抗体相遇,在适宜的电解质存在下,可发生凝集现象,在暗视野显微镜下明显可见。由于病人血清中可出现凝集素和溶解素,用活钩端螺旋体作凝集试验时,可同时出现凝集和溶解两种现象。当血清中抗体效价高时,发生溶解现象,而抗体效价低时,则发生凝集现象。本试验呈型特异性。

2、试剂

钩端螺旋体培养物:取钩端螺旋体标准株接种于Korthof或含兔血清的磷酸盐培养基中,28~30℃培养5~7天。用暗视野显微镜检查,每高倍视野不少于50条,运动活泼并无自凝的,即可作为活抗原。加最终浓度为0.5%福尔马林溶液,置28~30℃过夜,即为死抗原。

3、操作方法

(1)将受检血清置56℃水浴灭活30min,并用生理盐水稀释25倍。

(2)取稀释受检血清在10×75mm试管中按实际需要作系列倍比稀释,每管0.1ml,最后一管仅加生理盐水0.1ml作为抗原对照管。

(3)分别加入各群或各型钩端螺旋体悬液0.1ml,此时血清最终稀释度为1∶50、1∶100混合后,放置37℃2~3h。

(4)将各管重悬后取1滴悬液,分别放在载玻片上,覆以盖玻片,于高倍暗视野显微镜下观察其凝集溶解现象。

(5)结果判断:

(++++)几乎全部螺旋体发生溶解、破坏或变形,仅间有极少数正常螺旋体。

(+++)大部分螺旋体凝集成蜘蛛网状或团状,间或有少数游离。

(++)在半数视野中可见有凝集团存在,正常游离的螺旋体数较对照管少。

(+)仅有少数凝集,检查10个视野,仅1~2个视野中见有凝集团存在。

(-)全部螺旋体呈正常分散存在。

不适宜人群

无检查适应症者不宜做此项检查。

不良反应与风险

一般无并发症和危害。