专科分类：传染病检查检查分类：病原微生物检查

适用性别：男女均适用是否空腹：空腹

参考价格：35元/项

(1)目测法棕色或黄色为HDAg阳性，无色为阴性。

(2)比色法应用酶标仪测定波长492nm的光吸收值(A)，根据样品的A值和阴性对照A平均值计算S/N值或阈值，凡样品S/N值≥2.1或大于阀值为阳性，反之为阴性。

阈值=阴性对照A492平均值×2.1。

丁型肝炎病毒抗原，存在受感染的肝组织细胞内，外周血的完整病毒内，患者外周血中HDAG阳性表明体内有丁肝病毒复制，血中有丁型肝炎病毒。

(1)由于丁型肝炎与乙型肝炎感染同时存在，外周血经除污剂处理后，可能HBAg与HBcAg同时存在，因此要注意注意防止HBcAg的干扰，故酶标记物中必须加入非标记的特异性中和HBcAg的单克隆抗体以排除之。

(2)由于外周血中抗原量少，血清不宜稀释至少要用30～50μl。

(3)测定结果最好用比色法，以免造成假阳性或假阴性。

(4)对可疑标本建议进行重复试验。

1、丁型肝炎抗原的测定原理

丁型肝炎病毒抗原外被乙型肝炎表明抗原(HBsAg)包裹，当用除污剂(Tween20或NP40)裂解后才被释放出来，利用抗原抗体特异性结合的免疫学原理，应用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行检测。

2、试剂

(1)抗-HDV IgG纯化抗体用于包被。

(2)HRP-抗HDV抗体。

(3)具有中和活性的抗HBc单克隆抗体ELISA滴度1∶10万，用于稀释HRP-抗HD。

(4)10%Tween 20。

(5)其它器材和溶液均同上。

3、操作方法

(1)取包被液稀释抗-HDV IgG包被聚苯乙烯板，每孔100μl放37℃1h，4℃过夜。

(2)洗3次后，每孔分别加入待检血清和阴、阳性对照血清50μl(阴性对照血清孔，阳性对照血清2孔)和10%Tween20 50μl，充分混合均匀后放室温过夜，使之裂解丁肝病毒表面包裹的HBsAg释放丁肝抗原。

(3)洗3次后，每孔加入50μl HRP-抗HDV抗体(稀释液中除含10%小牛血清外还含有10个ELISA单位的抗HBc单克隆抗体)，放45℃1h(或37℃2h)。

(4)洗3次后，每孔加50μl新鲜配制的底物液，放室温暗处显色15～30min后每孔加25μl 2mol/L H2SO4终止反应。

无检查适应症者不宜做此项检查。

一般无并发症和危害。