在补体的CRA中,旁路激活途径(AP)起主导作用,传统激活途径仅为促进作用。补体CRA的机制是,在补体与IC相互作用时,AP的C3转化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗体的格子状结构中并牢固与抗体结合,使部分抗原抗体的结合键断裂,较大的IC凝聚物变为较小的凝聚物,从而溶解于液相中。
(1)酶-抗酶法正常人CRA(X±SD)为0.38±0.12,正常参考范围可以为X±2SD即0.14~0.62。
(2)放射免疫法成人溶解率正常值为66.0±7.4%。
患自身免疫病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性活动性肝炎、肾小球肾炎等,补体裂解复合物的能力低下。补体系统正常可防止病理性IC的出现或使IC激活补体引起的炎症损伤减轻。而补体的先天或后天缺陷及补体系统的激活受阻可能是病理性IC出现的重要原因。
酶-抗酶法:
(1)补体并非对所有抗原抗体复合物都溶解,只能溶解可溶性抗原(多糖、蛋白、半抗原等)形成的IC。
(2)其他注意事项同酶免疫技术节。
(1)酶-抗酶法:
①取HRP-抗HRP复合物0.2ml,加待测血清0.1ml,置尖底离心管,于37℃水浴1h,时时摇动混匀。
②加入PBS 1ml,3000r/min,离心15min。
③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml,37℃ 1h呈色。加1mol/L NaOH 0.1ml终止反应,再加入PBS 3ml,测450nm吸光度。
④用PBS 0.1ml代替待测血清作为对照管调零。
(2)放射免疫法:
①试验组:
A.用含Ca2+、Mg2+明胶巴比妥缓冲液1∶3稀释待测血清45μ1,125I BSA-抗BSA复合物悬液5μl 37℃ 15min加冷PBS(pH7.2 0.15mol/L)1ml。
B.1800r/min离心20min,弃上清,用γ-闪烁计数仪测沉淀cpm。
②对照组:自然溶解,正常人混合血清56℃灭活30min取45μl。
正常溶解:正常人混合新鲜血清,取45μl。对照组所加其他试剂同实验组。
无特殊禁忌人群。
无相关并发症与危害。