HbF抗碱变性的能力比HbA2强，在碱性溶液中，其他Hb在碱性溶液中可变性而被沉淀剂沉淀。而HbF不易变性沉淀，测定其滤液中Hb含量，即为HbF的含量。可用比色法测定其含量。
见表1。
(1)如滤液呈淡黄或淡红色，可能为血红蛋白含量高，但首先应检查所用碱液及酸性半饱和硫酸铵的质量，因碱液的碱度不足或酸性半饱和硫酸铵的浓度和酸度不足皆可导致滤液不呈水样透明而呈淡黄，淡红等颜色。使结果错误地增高。
(2)碱液浓度必须准确，其pH必须大于12，校准后最好是小分装密封保存，使用量和作用时间都必须十分准确。
(3)酸性半饱和硫酸铵必须准确配制，其pH应为3.0，最好小批量分装。
(4)过滤用纸应为化学试验用品。型号必须稳定，滤液必须清晰透明，否则应重新过滤1次或离心沉淀。
(5)试验所用试管，吸管等仪器不可沾污酸碱。
(6)每次试验最好重复做两份。
(1)取0.083mol/L KOH 1.6ml加于试管中，置25℃水浴。
(2)待5～10min后加0.1ml血红蛋白溶液，立即开动秒表，用吸管洗6次,轻轻摇动试管10s。此步操作需在20s内完成。
(3)准确计时60s后，加入酸性硫酸铵液3ml，立即颠倒混匀6次。
(4)用滤纸过滤，取滤液在540nm波长下比色，以蒸馏水作空白，读取抗碱血红蛋白的吸光度。
(5)另取血红蛋白溶液0.02ml，加入5ml水中，混匀，按上述方法比色，读出总Hb的吸光度。
(6)结果计算：抗碱Hb管的稀释度为1∶51，总Hb管的稀释度为1∶251，其比值为51∶251=0.203。
血友病及弥漫性血管内凝血者。
感染：采血后不要触及脏物，不要立即浸水洗手，以免感染。
