总补体活性是根据补体能使免抗羊红细胞抗体(溶血素)致敏的羊红细胞发生溶血,其溶血程度与总补体活性有关,但非直线关系。总补体活性测定主要反映补体(C1~C9)经传统途径活化后的活性。血清总补体活性的变化,对某些疾病的诊断和治疗有极其重要的作用。
本法测得的健康人正常值为50~100U/ml。
在许多病理情况下,血清补体含量可以发生变化,因此临床上观察补体含量的动态变化,如总补体活性、补体个别成分特别是C3和C4量的变化等,对一些疾病的诊断、病因研究及预后判断都有一定意义。但补体量的降低,并不一定就是免疫紊乱或免疫性疾病。现知缺血、凝固性坏死和中毒性坏死,可使组织释放较多的蛋白分解酶,导致补体溶血活性和每个补体成分下降。某些先天性补体缺乏症也可出现某个补体成分的缺损,因此需对具体情况作详细分析。
(1)受检血清必须新鲜,如放置室温2h以上,会使补体活性下降。
(2)补体的溶血活性受多种因素的影响,如绵羊红细胞浓度及致敏抗体的量等。当每一致敏红细胞吸附的抗体分子低于100时,红细胞溶解程度随细胞浓度的增加而减少。当用高浓度抗体致敏时,溶血程度随细胞的增加而增加。红细胞浓度增加一倍,可使50%溶血补体量增加25%左右。钙、镁离子的存在可稳定溶血系统。但含量过多时,反而抑制溶血反应。因此在进行试验时,需对反应的各个环节作严格控制。
(3)本试验不能测定补体蛋白的绝对值,也不能测定备解素系统中的成分。
(1)将待检血清按1∶20稀释,吸取待检血清0.2ml于一试管中,加入巴比妥缓冲液3.8ml,混匀。
(2)取10支试管加液混匀。
(3)将上述各管先与50%溶血标准管作初步目视比较,选择与标准管相接近的两管,用分光光度计在波长542nm读数,求出二者中更加接近标准光密度数的一管。根据此管中加入稀释血清的量按标准求出总补体值。
无特殊禁忌人群。
无相关记录。