补体激活的旁路途径(alternativepathway,AP)激活时,补体前段成分(C1,4,2)不活化。参与AP激活的除C3~C9外,尚有P、D、B等因子。
83%~121%。
补体旁路途径活化,参与的成分为补体C3、C5~C9、P因子、D因子、B因子等,其中任何成分的异常都可引起旁路途径溶血活性的改变。AP-CH50溶血活性显著增高见于某些自身免疫病、肾病综合征、慢性肾炎、肿瘤、感染等,降低则见于肝硬化、慢活肝、急性肾炎等病症。
(1)血清中补体不稳定容易破坏,4℃仅能放置1d,0℃可放5d,-20℃可放置1个月。
(2)稀释液中Mg2+浓度过高过低都会影响AP-CH50活性。
(3)稀释液的pH:最适宜的pH为7.2~7.5,否则影响结果。
(4)不同个体的RE对测定结果有影响。
B因子溶血活性的测定原理:未致敏的家兔红细胞(RE)(有类似酵母多糖或菊糖对人补体的作用)可在含Mg2+的EGTA缓冲液稀释的人血清中激活AP,引起溶血。溶血的程度可反映AP活性。
试剂:
(1)0.1mol/L EGTA:取NaOH3.5g,溶于蒸馏水85ml中,加入EGTA(乙二醇双乙胺醚四乙酸)19g使之溶解,补足蒸馏水至500ml。
(2)巴比妥缓冲原液:NaCl 121.25g,巴比妥1.44g,巴比妥钠0.94g,蒸馏水补足500ml。
(3)稀释液:0.1mol/L EGTA80ml,巴比妥缓冲原液180ml,MgCl2·6H2O0.41g,蒸馏水补至1000ml,以1mol/L NaOH调pH至7.5。
(4)0.5%RE悬液:取保存于Alsever液的RE以生理盐水洗2次,稀释液洗1次后配成0.5%悬液(RE3×108/ml)。
(5)被测血清:被测血清分离后立即置-20℃保存,用前以稀释液1∶4稀释,37℃水浴10min。
(6)50%溶血标准管:取0.5%RE0.2ml,加入蒸馏水0.8ml。
操作方法:按表加入各反应液。
暂无禁忌人群。
暂无相关症状和危害。