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淋巴细胞毒试验

当特异的效应T淋巴细胞在体外与靶细胞接触时,可表现出破坏和溶解靶细胞的特性,称为淋巴细胞毒作用。靶细胞可以是肿瘤细胞或其它组织细胞。淋巴细胞杀伤靶细胞的方式可通过直接杀伤或产生淋巴因子破坏靶细胞。这就是淋巴细胞毒试验。一些淋巴细胞,如CTL,NK,LAK等对靶细胞具有直接的杀伤作用,可以根据待检测的效应细胞的性质,选用相应的靶细胞,如肿瘤细胞,移植供体细胞等。该实验可用与肿瘤免疫,移植排斥反应,病毒感染等方面的研究。方法有:铬释放法,乳酸脱氢酶释放法,凋亡细胞检测法等。

基本信息

专科分类:肿瘤科检查分类:免疫检查

适用性别:男女均适用是否空腹:空腹

参考价格:50-90元

分析结果:

低于正常值时:

正常值:

高于正常值时:

阴性:
正常。

阳性:
暂无相关数据。

温馨提示:
保持平常心态。
正常值

形态学检查法比较受检组与对照组,P<0.05。

125I或51Cr法P>0.05。

临床意义

异常结果:本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标;也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力,来判断肿瘤患者的预后;还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。

需要检查的人群:淋巴细胞毒交叉试验也称补体依赖细胞毒试验(CDC)。它是检查器官移植受者体内有无针对供者,或者供者针对受者的HLA抗体,在器官移植前一定要进行CDC检测。

注意事项

(1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时,实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞,对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。若检测其它样品如肿瘤抗原或免疫原、治疗药物等与细胞免疫的关系,则应增设第3组,在此试验组中先使淋巴细胞与待测样品作用,继经洗涤后再观察此“致敏淋巴细胞”对肿瘤靶细胞的杀伤作用。此时前两组成为对照组。

(2)靶细胞与淋巴细胞的活率要处于最佳状态,一般要>90%。

(3)加入培养液中的小牛血清须先作毒性试验。

(4)接种靶细胞和淋巴细胞的计数要准确。

(5)实验组和对照组应安排在同一块板上以减少误差。

(6)培养液的pH以6.8~7.2最为适宜。

检查过程

(1)靶细胞的接种:选用能贴壁生长的肿瘤细胞,用Hank液洗涤后经2.5g/L胰酶消化2~3min,倒去胰酶液(细胞仍贴在瓶壁),用Hank液轻洗细胞3次,倒去Hank液。用含10%~20%小牛血清的RPMI 1640液将贴壁细胞冲洗下来,用100目滤网过滤除去细胞团块,制备成1×106/ml单个肿瘤细胞悬液,用滴管吸取细胞悬液滴入40孔培养板中,每孔1滴(约含100~150个细胞),置培养板于37℃含5% CO2孵箱中20h。取出培养板甩去其中培养液,瑞氏染色后计数每10孔中平均贴壁的肿瘤细胞数,如果两组平均数相差>1/3,表明误差太大不能使用,如果误差不大其它各培养板可进行正式试验。

(2)分离淋巴细胞:取受检者肝素抗凝血3ml,用聚蔗糖-泛影葡胺分层液分离淋巴细胞后再用Hank液洗3次,然后用RPMI 1640液配成(2~3)×105/ml细胞悬液。

(3)细胞毒试验:淋巴细胞和靶细胞按200∶1比例混合,每孔中加入(2~3)×104个淋巴细胞(0.1ml体积中)约每孔再加入含20%小牛血清的RPMI 1640液0.1ml,置培养板于37℃ 5%CO2孵箱中40h。取出培养板甩去培养液,瑞氏染色后于显微镜下计数培养板底部残留的靶细胞数。

不适宜人群

暂无禁忌。

不良反应与风险

暂无相关并发症和危害。

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