聚丙烯酰法可将γ谷氨酰转移酶分为4型,即γGT1、γGT2、γGT3、γG4。测定γ谷氨酰转移酶同工酶有助于肝癌的诊断。
(1)聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分13条区带:Ⅰ、Ⅰ’、Ⅱ、Ⅱ’、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶa、Ⅶb、Ⅷa、Ⅷb、Ⅷc。正常仅有10条区带,无Ⅰ’、Ⅱ、Ⅱ’带。
(2)醋纤薄膜电泳法分4条区带:r-GTP1、r-GTP2、r-GTP3、r-GTP4。正常以r-GTP3为主。活力大小r-GTP3>r-GTP2>r-GTP1。
γGT1 0.6321±0.0486;
γGT2 0.0724±0.0223;
γGT3 0.1841±0.0314;
γGT4 0.1114±0.0272。
(γGT1>γGT3>γGT4>γGT2)
(注具体参考值请根据各实验室而定。)
异常结果
(1)出现r-GTPⅡ区带见于原发性和继发性肝癌。r-GTPⅠ’、Ⅱ/Ⅱ’区带为肝癌的特异性新带,其他肝胆病(转移性肝硬化、酒精性肝炎、胆管细胞癌)则不出现新区带。
(2)肝实质细胞损坏以r-GTP1升高为主,肝外胆道疾病以r-GTP2为主,亦可出现r-GTP4区带,且r-GTP2>r-GTP1>r-GTP3。
检查前:
1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。
2、抽血前禁食12小时,取新鲜血液送检。
检查时:
抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。
检查后:
1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。
2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,更应延长按压时间。
3、抽血后出现晕针症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行体检。
4、若局部出现淤血,24小时后用温热毛巾湿敷,可促进吸收。
比色法:
(1)缓冲液种类不同,酶反应的最适pH亦不同,以Tris缓冲液最为适宜。
(2)底物缓冲液中游离的α-萘胺不稳定,且对酶有抑制作用。故配制时应注意温度的影响,如试剂空白管吸光度>0.08,则应将L-γ-谷氨酰-α-萘胺重结晶,以除去游离α-萘胺。
(3)1g/L亚硝酸钠溶液不稳定,应每周配制1次。
(4)标本易采用血清,并可用EDTA-Na2(1mg/ml)抗凝血浆,其他抗凝剂可影响结果。
(5)GGT较稳定,室温放置2天,4℃ 1周酶活力无变化,但65℃ 1min全部失活。
采取受检测者的血液立即送检,用免疫学法检测。
不适宜人群:需要检测的人群有肝异常,肝硬化,肝炎的人。无检查适应症者不宜检测。
1、感染:采集血液时注意无菌操作,采血处避免水液等污染,以免局部感染。
2、出血:采血后给予充分按压时间,尤其有凝血障碍,出血倾向者,避免局部皮下渗血,淤青肿胀。